Исследование предназначено для выявления суммарных иммуноглобулинов (IgA, IgG, IgM) к коронавирусу SARS-CoV-2. Одновременное определение антител нескольких типов позволяет повысить диапазон чувствительности и информативность теста, поскольку сроки появления иммуноглобулинов различных классов при COVID-19 индивидуальны. Тест нацелен на выявление антител к RBD-домену спайкового (S) белка - именно они являются нейтрализующими (уничтожают вирус) и имеют большую клиническую значимость. Тест-система обладает максимальной чувствительностью и специфичностью и является верифицирующей (подтверждающей) для лабораторной диагностики COVID-19 (Временные методические рекомендации МЗ РФ, версия 10 (08.02.2021). Выдается единый результат для IgA, IgM, IgG (без уточнения класса выявленных антител) в качественном формате: «положительный»/«отрицательный». Исследование рекомендовано: 1) для снятия неопределенности иммунного статуса в отношении COVID-19 и более точного определения, был ли контакт с вирусом SARS-CoV-2; 2) как скрининговый тест перед вакцинацией для выявления лиц с бессимптомной формой инфекции.
Синонимы русские
Анализ крови для качественного суммарного определения антител к RBD домену спайкового (S) белка SARS-CoV-2 (IgG, IgM и IgA); антитела к рецептор-связывающему домену спайкового (S) белка вируса SARS-CoV-2, качественный тест.
Синонимы английские
SARS-CoV-2 Spike (S) Protein Receptor-Binding Domain (RBD) antibodies, total IgG/IgM/IgA.
Метод исследования
Иммуноферментный анализ.
Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
У лиц, зараженных вирусом SARS-CoV-2, симптомы COVID-19 могут не развиваться (случаи бессимптомного течения инфекции), быть слабовыраженными (малосимптомное течение) либо находиться в диапазоне от умеренно до крайне выраженных.
В ряде случаев может оказаться полезным применение серологических тестов для определения антител, вырабатывающихся в организме человека в ответ на заражение вирусом SARS-CoV-2.
Тесты на антитела обнаруживают иммуноглобулины, которые вырабатываются в качестве иммунного ответа человека на инфекцию SARS-CoV-2. Положительный результат свидетельствует о том, что человек потенциально подвергался воздействию SARS-CoV-2. Когда присутствуют антитела к иммуноглобулинам M (IgM), они могут указывать на активную или недавнюю инфекцию, тогда как антитела к иммуноглобулину G (IgG) появляются позже в процессе протекания инфекции и часто могут указывать на прошлую инфекцию, но не исключают недавнюю инфицированность пациентов, которые все еще могут быть заразными, особенно когда одновременно обнаруживаются антитела IgM.
Результаты исследований показали, что IgA вместе с IgG играют важную роль в нейтрализации SARS-CoV-2. Среди антител IgA является преобладающими антителами, присутствующими на поверхности слизистой оболочки и обеспечивающими защиту от вируса в дыхательных путях. IgA способствуют захвату антигенов в слизи, предотвращая прямой контакт патогенов с поверхностью слизистой оболочки. Положительный результат теста на IgA к нуклеокапсиду SARS-CoV-2 в первую неделю инфирования составляет 92,7 % по сравнению с положительным результатом теста на IgM (85,4 %) и IgG (77,9 %). Кроме того, сообщается о роли IgA в нейтрализации SARS-CoV-2 на ранних стадиях инфекции вместе с IgG. Эти данные свидетельствуют о том, что оба вида антител работают вместе, чтобы нейтрализовать вирус.
Среди IgG преобладающие подтипы, которые обеспечивают противовирусную активность, - это IgG1 и IgG3. Оба подтипа IgG связываются со всеми классами Fc-гамма-рецепторами человека (FcyR) для выполнения его эффекторной функции и являются результатом Th1-ответа. Напротив, IgG2 и IgG4 - результат Th2-ответа и в основном связаны с полисахаридными антигенами, и было также показано, что они индуцируются после вирусной инфекции.
Несколько вакцин против SARS-CoV2 находятся на разных стадиях клинических испытаний в разных популяциях. Понимание реакции антител, особенно подтипов IgA и IgG с точки зрения титров после естественной инфекции и выздоровления имеет большое значение для оценки реакции, вызванной вакциной.
Гуморальные иммунные реакции играют решающую роль в защите людей от инфекции SARS-CoV-2, особенно благодаря активности нейтрализующих антител. IgA доминируют в раннем специфическом ответе антител к SARS-CoV-2 по сравнению с концентрациями IgG и IgM.
Гуморальные иммунные реакции обычно характеризуются первичными реакциями антител IgM, за которыми следуют вторичные реакции антител, связанные с иммунной памятью и состоящие из IgG, IgA и IgE. В ранних гуморальных реакциях, специфичных к SARS-CoV-2, преобладают антитела IgA. Из специфичных к вирусу антител - IgG, IgM и IgA - IgA в большей степени способствуют нейтрализации вируса по сравнению с IgG.
Также возможно, что "созревание" системного ответа IgG может быть немного задержано по сравнению с ответом IgA слизистой оболочки. Исследования показывают, что сывороточный IgA, особенно анти-RBD IgA, обнаруживается раньше по сравнению с IgG. Время до положительной реакции против RBD заметно меньше для IgA, чем для IgG, а потенциал нейтрализации сыворотки связан с антителами изотипа IgA против RBD.
После заражения COVID-19 описано два типа антител: связывающие и нейтрализующие. Связывающие антитела - это те, которые могут быть обнаружены в крови пациента, что может указывать на наличие предшествующей инфекции без определенного описания ингибирования репликации вируса. Обнаружение нейтрализующих антител (Nab), с другой стороны, является более специализированным и основано на функциональной способности антител в сыворотке/плазме предотвращать заражение вирусом in vitro.
Серологическое тестирование не заменяет вирусологического и не должно использоваться для установления наличия или отсутствия острой инфекции SARS-CoV-2.
Кроме того, было доказано, что нейтрализующие антитела имеют положительную корреляцию с возрастом, мужским полом и тяжестью заболевания. Исследования показали, что Nab были выше у пожилых пациентов по сравнению с пациентами среднего и молодого возраста, причем последние имели более низкие титры нейтрализации. Кроме того, титры Nab положительно коррелировали с уровнем С-реактивного белка и отрицательно с количеством лимфоцитов на момент поступления. Следует отметить, что у молодых людей не обязательно будут низкие титры, так как в том же исследовании также были обнаружены два пациента с очень высокими титрами нейтрализации в этой возрастной группе, что побудило рассмотреть другие факторы. Что касается различий по полу, несмотря на то что у мужчин и женщин, по-видимому, одинаковый риск заражения этим вирусом, существуют значительные различия в ходе и исходе инфекции у них, а также наблюдаются худшие исходы и более высокие титры Nab среди мужского населения. Действительно, клинические результаты показывают, что у мужчин более высокая тяжесть течения и смертность от инфекции COVID-19, чем у женщин.
Большинство доступных серологических анализов SARS-CoV-2 выявляют иммуноглобулин М (IgM), иммуноглобулин G (IgG), иммуноглобулин А (IgA) или общие антитела. Современные данные подтверждают, что сероконверсия происходит примерно через две недели после появления симптомов. В некоторых литературных источниках предполагается, что обнаружение антител IgM и IgA по сравнению с IgG может указывать на более раннюю инфекцию. Сообщалось о различной чувствительности и специфичности анализов, обнаруживающих IgM, IgG или суммарные антитела, причем некоторые исследования показали, что иммуноанализы с общими антителами могут быть более чувствительными. По сравнению с IgM ожидается, что IgG будет играть большую роль в серологическом мониторинге COVID-19 из-за его классически более длительного ответа.
Для чего используется исследование?

Для снятия неопределенности иммунного статуса в отношении COVID-19 и более точного определения, был ли контакт с вирусом SARS-CoV-2;
Как скрининговый тест перед вакцинацией для выявления лиц с бессимптомной формой инфекции.

Когда назначается исследование?

При подтверждении инфекции SARS-CoV-2 у пациентов с ПЦР-положительным тестом на COVID-19.
При обследовании инфицированных, но бессимптомных пациентов по COVID-19.
При обследовании пациентов с COVID-19, проверенных через несколько недель после начала заболевания.
При обследовании пациентов с низкой вирусной нагрузкой по COVID-19.
При проверке восприимчивости или устойчивости к последующему повторному заражению и при проведении эпидемиологических и надзорных исследований.
При скрининге донорской крови для переливания пациентам с тяжелой формой COVID-19.
При диагностике подозрительных пациентов с отрицательными результатами ОТ-ПЦР и для выявления бессимптомной инфекции.
Что означают результаты?
Референсные значения
Результат: отрицательный.
КП (коэффициент позитивности): 0 - 0,8.
Положительный результат:

иммунный ответ вследствие воздействия вируса SARS-CoV-2 (недавнего или прошлого);
иммунный ответ на вакцинацию против SARS-CoV-2 препаратами вакцин на основе S-белка.

Отрицательный результат:

ранее не было воздействия SARS-CoV-2;
инкубационный период инфекции или ее ранняя стадия;
отдаленные сроки после перенесенной инфекции (более 3-5 месяцев).

Что может влиять на результат?
Эффективность серологических тестов существенно различается в зависимости от исследуемой группы (например, среди пациентов с легкой, умеренной и тяжелой формами заболевания или в группах пациентов молодого и пожилого возраста), а также от продолжительности выполнения теста и вирусного белка, являющегося "мишенью". Для более полного понимания этих различий в эффективности тестов необходимы дальнейшие исследования. При проведении тестов на выявление антител к коронавирусу может происходить перекрестная реакция с другими антителами, например, к другим патогенным микроорганизмам, в том числе другим коронавирусам человека, либо с биологическими маркерами наблюдающихся у пациента состояний (беременность, аутоиммунные заболевания), что может приводить к ложноположительным результатам.
Серологические исследования не должны применяться в качестве самостоятельного средства диагностики острой инфекции в клинической практике или при отслеживании контактов. Интерпретация выполненного теста должна производиться специалистом, она будет зависеть от ряда факторов, в том числе длительности заболевания, клинических проявлений, эпидемиологических характеристик и распространенности инфекции в конкретных условиях.
Определение фрагментов вирусных частиц, таких как белки или нуклеиновые кислоты, при помощи вирусологического исследования является наиболее убедительным признаком вирусной инфекции. Результаты такого тестирования могут быть положительными у зараженных лиц, не имеющих симптомов инфекции (бессимптомное течение) либо до появления симптомов (предсимптомная стадия), а также в течение всего периода болезни (манифестная инфекция). В дебюте заболевания COVID-19 спектр симптомов может быть крайне разнообразным. Симптомы заболевания могут быть стертыми или проявляться выраженными признаками пневмонии, лихорадочным состоянием/сепсисом или реже гастроэнтеритом либо неврологическими нарушениями. При необходимости пациенты должны проходить тестирование на другие патогенные микроорганизмы в соответствии с рекомендациями по клиническому ведению случаев заболеваний на местном уровне, тем не менее это не должно отменять проведение тестов на определение вируса SARS-CoV-2.